小鼠排卵(ovulation)控制分為排卵時間控制與排卵數量控制。其中,排卵時間控制的目的是得到特定發育階段的卵母細胞,如原核注射法轉基因使用的原核胚,病毒感染法使用的著床前胚胎。
排卵數量控制又稱超數排卵(multiple ovulation),目的是為了獲得更多的卵母細胞。超數排卵模擬了體內卵母細胞發育、成熟與排放的激素調節模式,通過注射不同的促性腺激素,刺激暫時處于休止狀態的卵母細胞進入成熟發育期,成熟后排入于輸卵管。
由此可以獲得比自然排卵時更多的卵母細胞或胚胎。在體外受精、胚胎體外冷凍保存、基因修飾動物和克隆動物的實驗操作中都需要大量的卵細胞,而動物正常的排卵量是有限的,所以超數排卵技術顯得實用而重要。
目前在控制小鼠排卵中常用的激素有促進卵泡發育的促卵泡素(follicular stimulating hormone,FSH)和促進排卵的促黃體素(luteinizing hormone,LH)及其各自比較經濟的替代物孕馬血清(pregnant mare serum gonadotrophin / equine chorionic gonadotrophin,PMSG/eCG)和人血絨毛膜促性腺素(human chorionic gonadotrophin, hCG)。
小鼠的發情沒有季節性限制,主要受環境影響,尤其是光照控制。小鼠排卵多在暗周期的中點。因此,常用皮下或腹腔注射PMSG 5~10 IU,48~50 h后皮下或腹腔注射相同劑量的hCG。
注射hCG后的母鼠即與公鼠合籠,并于第二天早上10時前檢查母鼠是否有陰道栓,如見到栓則說明已交配過,計作懷孕0 d。通過超排實驗,曾有1只昆明小鼠獲得83枚胚胎、1只長爪沙鼠獲得42枚,1只金黃地鼠獲得72枚胚胎以及1只兔子獲得88枚胚胎的記錄,由此可見,超排的效果確實可觀。
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諾恩諾德比較醫學中心負責人黎立博士,原為中國人民解放軍總醫院第八醫學中心比較醫學中心(實驗動物中心)負責人,曾參與國家“十二五”、“十三五”專項課題10余項,曾參與國家自然科學基金項目20余項,曾參與完成國家自然科學基金課題10余項,參與完成軍隊科研課題20余項;獲得國家發明專利8項,發表學術論文30余篇。
黎立博士師從鄭兆榮教授,鄭兆榮教授為吉林大學(中國人民解放軍農牧大學)教授、病理解剖學教研室主任、第六屆全國政協常委,長期從事病理形態學的研究。同時,黎立博士也與臨床醫學相關院士保持著良好的合作關系。
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